کاربرد مورد نظر:

کیت Free Testosterone ELISA  برای تشخیص کمی Free Testosterone  در سرم یا پلاسمای انسان استفاده می شود.

خلاصه و اساس تست:

کیت Testosterone ELISA  براساس تکنیک “اتصال رقابتی ( competitive binding)” بین تستسترون موجود در نمونه و Testosterone-HRP conjugate  برای مقدار ثابتی از Anti-Free Testosterone می باشد. است. در این انکوباسیون ، آنتی بادی علیه تستسترون در چاهک ها کوت شده است . این آنتی بادی ها با 25 میکرولیتر از استاندارد های ، نمونه بیمار، 50 میکرولیتر از محلول کنجوگه تستسترونHRP و50 میکرولیتر از محلول آنتی بادی anti- free testosterone در دمای اتاق برای 60 دقیقه انکوبه می شوند. در طی انکوباسیون، مقدار مشخصی از HRP که تستسترون به آن چسبیده است ، با تستسترون درون استانداردها و نمونه برای تعداد مشخصی جایگاه آنتی بادی Free Testosterone    رقابت می کنند. همچنین ، از لحاظ ایمونولوژیکی مقدار کنجوگه پراکسیداز تستسترون که در چاهک ها وجود دارند ، با افزایش غلظت Free Testosterone در نمونه، کاهش می یابد پس از شست شو ، 100میکرولیتر از محلول رنگزا (TMB) اضافه می شود و پلیت برای 15 دقیقه در دمای اتاق انکوبه می شود. نتایج در طیف رنگی آبی مشخص می شوند. این تغییرات طیف آبی با اضافه کردن 50 میکرولیتر از محلول متوقف کننده ( stop solution) متوقف می شود. جذب نوری به وسیله اسپکتوفتومتر در طول موج 450 نانومتر محاسبه می شوند.