کیت الایزای تشخیص کیفی آنتی ژن سطحی هپاتیت
کیت الایزای تشخیص کیفی آنتی ژن سطحی هپاتیت B(HBs-Ag) در شرایط آزمایشگاهی در سرم یا پلاسمای انسانی.
استفاده در نظر گرفته شده برای کیت HBs Ag :
یک کیت تشخیصی بر اساس تکنیک ایمونواسی آنزیمی جهت تشخیص کیفی آنتی ژن سطحی هپاتیت (HBs-Ag) در سرم یا پلاسمای انسانی (هپارین، سیترات یا EDTA) می باشد.
خلاصه و اساس تست HBs Ag :
آنتی ژن سطحی هپاتیت (HBs-Ag) اولین نشانگری است که پس از عفونت با ویروس هپاتیت (HBs-Ag) چند روز یا چند هفته قبل از بروز علائم بالینی در خون ظاهر می شود. (HBs-Ag) یک پلی پپتید لیپوپروتینی است که پوشش خارجی ویروس هپاتیت B را تشکیل می دهد. تشخیص HBs-Ag در سرم یا پلاسمای انسانی نشان دهنده عفونت مداوم به ویروس هپاتیت B، چه حاد یا مزمن است. تست های تکمیلی برای تشخیص ویروس هپاتیت B برای تعیین وضعیت بیماری مورد نیاز است. سنجش HBs-Ag نه تنها برای تشخیص عفونت‌های ویروس هپاتیت B بلکه برای نظارت بر سیر بیماری و اثربخشی درمان ضد ویروسی استفاده می‌شود.
در این کیت از آنتی بادی های مونوکلونال و پلی کلونال برای تشخیص انتخابی سطوح بالای HBs-Ag در سرم یا پلاسما استفاده شده است.
نمونه هایی که طبق آنالیز و دستورالعمل کیت غیر واکنشی برای حضور HBs-Ag هستند، منفی در نظر گرفته می شوند. نمونه هایی که واکنش مثبت داده اند باید مجددا تکرار شوند ( طبق پروتکل مرجع و امور آزمایشگاه ها).
در صورت نتیجه یکسان، نمونه باید از نظر واکنش پذیری HBs-Ag با تکنیک های تاییدی معتبر تایید شود.
نکته: رنگ چاهک بلانک باید بی رنگ تا زرد روشن باشد. در غیر این صورت، نتایج آزمایش نامعتبر است.
جذب چاهک بلانک: مقدار جذب باید کمتر از 0.1 باشد.
Sandwich Principle | Assay Type |
Ready to use | Conjugate |
Positive and negative | Control |
سوالات متداول
بروز رنگ اضافی در چاهک ها به علت ایجاد پیوند های غیر اختصاصی و یا عدم شست شوی مناسب می باشد که باید مراحل شست شو اصلاح شود برای کیت مورد نظر ما باید حتما از محلول شست شوی خود کیت Hbs-Ag GBC استفاده بفرمایید.
شستشو ها را با توجه به دستورالعمل کیت انجام دهید ( 6 مرتبه با واشر اتوماتیک و 8 مرتبه بصورت دستی- هر دو روش با soaking time 20 تا 30 ثانیه).
در عیب یابی سیگنال پس زمینه استفاده از چاهک بلانک مفید است، برای استفاده از چاهک بلانک، از جایگاه A1 به عنوان اولین چاهک استفاده کنید. توجه داشته باشید که در چاهک بلانک فقط محلول های TMB و STOP اضافه شده و مراحل شست شو انجام می پذیرد( کانژوگه و دیگر محلول ها در این چاهک اضافه نشود) .
برای ساخت محلول شست شوی کیت های الایزا باید با توجه به نسبت ذکر شده در بروشور کیت اقدام به تهییه محلول شست شو کرد. نکات مهم در ساخت این محلول این است که اولا به نسبت اشاره شده در کیت رقیق شود و اگر رقت درست صورت نگیرد و محلول غلیظ تر از حد توصیه شده باشد منجر به تخریب و جدا شدن مولولکولهای اتصال یافته می شود و بر عکس اگر رقیق شود کاهش توانایی محلول شستشو بدلیل رقیق سازی زیاد باعث عدم جدا شدن اتصالات غیر اختصاصی و ایجاد جذب زمینه ای بالا می شود.
بعلت اینکه محلول شست شو بسیار غلیظ است در طول زمان نگهداری امکان ایجاد رسوب و کریستال در ته بطری وجود دارد برای رفع این مشکل باید بطری برای مدت زمانی در دمای 37 درجه نگهداشته شود (بن ماری یا انکوباتور) تا کریستال های آن حل شوند و سپس اقدام به ساخت محلول شست شو کرد.
