کیت تشخیص کمی HPV Quant21 Quantitative Real Time PCR
کیت PCR HPV-QUANT-21 برای شناسایی و تعیین کمیت انواع تایپ های ویروس پاپیلومای انسانی کم خطر ( ژنوتایپ های ۶، ۱۱ و ۴۴) و انواع تایپ های ویروس پاپیلومای انسانی پرخطر ( ژنوتایپ های 18، 26، 31، 33، 35، 39، 45، 51، 52، 53، 56 ، 58، 59، 66، 68، 73، 82 و ۱۶) طراحی شده است.
طراحی کیت بر مبنای تشخیص نوکلئیک اسیدهای HPV با کمک واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) در نمونه های بیولوژیک انسانی نظیر سواب سلول های اپیتلیال، مایع پروستات، منی، ادرار و یا بیوپسی می باشد.(1)
دامنه ی کاربرد
*غربالگری پیشگیرانه HPV به منظور تشخیص پیش از ابتلا به سرطان و سرطان دهانه رحم،
*نظارت بر بیماران مبتلا به عفونت HPV،
*تشخیص عفونت HPV در انکوپاتولوژی دهانه رحم، آلت تناسلی، پروستات، مقعد، حنجره، بیماری های التهابی دستگاه تناسلی در زنان و مردان.
مبنای واکنش
روش PCR انجام شده بر اساس تکثیر یک توالی DNA هدف بر مبنای Hot start می باشد. تهیه مخلوط واکنش شامل دو لایه می باشد که توسط یک لایه پارافین جدا شده اند. واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)با ذوب شدن پارافین شروع می شود. کیت تشخیص کمی PCR HPV-QUANT-21 بر اساس خوانش ماده ی فلورفور در حین واکنش PCR می باشد.
*پروب های DNA مورد استفاده برای تشخیص تکثیر محصول HPV شامل فلوفورهای ROX، FAM و Cy5 می باشد.
*برای تشخیص محصول واکنش PCR کنترل داخلی (IC) ازرنگ فلورسنت Hex استفاده شده است.
*یک لوله حاوی یک مخلوط PCR برای تکثیر DNA ژنومی انسان (SIC) می باشد. حضور نمونه ی SIC سبب حذف خطا های پیش تحلیلی می گردد. اگر مقدار مواد جمع آوری شده برای تجزیه و تحلیل مناسب نباشد، تکرار روش نمونه گیری ضروری است. برای تشخیص SIC از رنگ فلورفور FAM استفاده شده است.
شرایط نگهداری کیت
| دمای نگهداری | از 2 درجه سانتیگراد تا 8 درجه سانتیگراد |
| حساسیت به نور و دما | دما و نور بیش از حد برای عملکرد محصول مضر می باشد |
| حمل و نقل | ظروف عایق با کیسه یخ با انواع حمل و نقل سرپوشیده ( دمای 2 درجه تا 8 درجه سانتیگراد) |
| تاریخ انقضا | از زمان تولید به مدت ۱۲ ماه |
حساسیت تست
حداقل غلظت ویروس بالینی مورد تشخیص1000 کپی DNA HPV در هر 10000 سلول های انسانی می باشد..
اختصاصیت تست
با هیچ کدام از عوامل بیماری زایی که در جدول زیر آماده است واکنش متقاطعی (cross-reaction) دیده نشده است:
| Microorganisms |
| Ureaplasma urealyticum |
| Gardnerella vaginalis |
| Mycoplasma hominis |
| Candida albicans |
| Herpes Simplex Virus |
| Staphylococcus sp |
| Lactobacillus spp |
| Streptococcus sp |
مشخصات
ویژگی های کیت RTP HPV Quant21 Quantitative Real Time PCR بصورت اختصاری در جدول زیر ارائه شده است:
| توضیحات | |
| روش مورد استفاده | Real-time PCR |
| ژنوتایپ های مورد تشخیص | low-risk (HPV 6, 11, 44) high-risk (HPV 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) |
| کنترل داخلی | بتاگلوبین |
| حساسیت | 1000 کپی DNA HPV در هر 10000 سلول های انسانی |
| اختصاصیت | 100 % |
| مدت زمان انجام واکنش | 90 دقیقه |
