کیت RTP HPV Genotyping kit  امکان تشخیص و تعیین ژنوتیپ های انواع ویروس پاپیلومای انسانی پرخطر که توسط سازمان بهداشت جهانی (WHO) برای غربالگری سرطان دهانه ی رحم پیشنهاد شده است را فراهم می کند. طراحی کیت بر مبنای تشخیص نوکلئیک اسیدهای HPV با کمک واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) در نمونه های بیولوژیک انسانی نظیر  سواب سلول های اپیتلیال، مایع پروستات، منی،  ادرار  و یا بیوپسی می باشد.

این کیت قابلیت تمایز و تشخیص  14 تایپ پرخطر شامل ( ژنوتایپ های 16، 18، 31، 33، 35، 39، 45، 51، 52، 56، 58، 59، 66 و 68) و یک ژن انسانی به عنوان کنترل داخلی را دارا می باشد.

دامنه کاربرد

* غربالگری پیشگیرانه HPV به منظور تشخیص پیش سرطان و سرطان دهانه رحم،

* نظارت بر بیماران مبتلا به عفونت HPV،

* تشخیص عفونت HPV در انکوپاتولوژی دهانه رحم، آلت تناسلی، پروستات، مقعد، حنجره، بیماری های التهابی دستگاه تناسلی در زنان و مردان.

مبنای واکنش

PCR-mix حاوی پروب های خاص شامل رنگ های فلورسنت گزارشگر و خاموش کننده است. پس از هیبرید شدن به دنباله قطعه ی هدف، پروب ها فعال می شوند و  در نتیجه فعال سازی فلورسانس متناسب با تقویت توالی هدف افزایش می یابد. شدت فلورسانس در هر چرخه واکنش با واحد جمع‌آوری داده‌های سیکل حرارتی Real-time PCR  اندازه‌گیری می‌شود و با نرم افزار ارائه شده مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرد.

*پروب های DNA مورد استفاده برای تشخیص تکثیر محصول HPV شامل فلوفورهای Rox ،HEX ، Fam و Cy5 می باشد.

*برای تشخیص محصول واکنش PCR کنترل داخلی  از رنگ فلورسنت Cy5 استفاده شده است.

شرایط نگهداری کیت

دمای نگهداری	دمای 20- درجه سانتیگراد
حساسیت به نور و دما	محلول پرایمر و پروب به نور حساس است
تعداد دفعات ذوب	با افزایش دفعات ذوب کردن مجدد مواد، از حساسیت کیت کاسته می شود
تاریخ انقضا	از زمان تولید به مدت ۱۲ ماه

حساسیت تست

کمترین سطح غلظت با نرخ نتایج مثبت بیش از 95 %در تایپ 16و 18 معادل  24 نسخه در واکنش و در 12 تایپ دیگر تا 300 نسخه در واکنش میباشد.

اختصاصیت تست

با هیچ کدام از عوامل بیماري زایی که در جدول زیر آمده است  واکنش متقاطعی (Cross reactivity)دیده نشد:

Microorganisms

Chlamydia trachomatis	Klebsiella.spp	Staphylococcus
Candida albicans	Agalactiae	Acidophilus
Trichomonas vaginalis	Entreobacter	Staphylococcus epidermidis
Adenovirus	Clostridium. Spp	Streptococcus pyogenes
Human Immunodeficiency Virus	Peptostreptococcus spp	Streptococcus aureus
Cytomegalovirus	Pseudomonas spp	Enterococcus Faecalis.spp
Hepatitis B	Bacteroides spp	Corynebacterium .spp
Hepatitis  C	Bifidobacterium	Escherichia coli
Herpes Simplex Virus 1	Proteus spp	Enterococcus
Herpes Simplex Virus 2	Neisseria gonorrhoeae	Fusobacterium .spp

مشخصات :

ویژگی های  کیت  RTP HPV Genotyping kit-Real Time PCR بصورت اختصاری در جدول زیر ارائه شده است:

توضیحات
روش مورد استفاده	Real Time PCR
ژنوتایپ های مورد تشخیص	16، 18، 31، 33، 35، 39، 45، 51، 52، 56، 58، 59، 66 و 68
حساسیت	در تایپ 16و 18 معادل  24 نسخه 12 تایپ دیگر تا 300 نسخه در واکنش
اختصاصیت	100%
مدت زمان انجام واکنش	80 دقیقه