نئوپلاسم میلوپرولیفراتیو مزمن ^[1](MPN) ، بدخیمی سلول های بنیادی خونساز کلونال می باشد، که با تولید بیش از حد سلول های خونی مشخص می گردد. MPN اغلب دارای یک جهش تک نوکلئوتیدی اکتسابی در JAK2 است که به عنوان C. G1849T مشخص می شود. موتاسیون JAK2 V617F یک تغییر ژنتیکی در ژن JAK2 است که در مسیر سیگنالینگ سلولی نقش مهمی دارد. این موتاسیون با فعال‌سازی مداوم مسیر JAK-STAT همراه است، که می‌تواند به تولید بی‌رویه سلول‌های خونی منجر شود. بررسی موتاسیون JAK2 V617F به تمایز این اختلالات میلوپرولیفراتیو از سایر شرایطی که ممکن است با علائم مشابهی مانند پلی سیتمی ثانویه^[2]یا ترومبوسیتوز^[3] واکنشی ظاهر شوند، کمک می کند. علاوه بر این، وجود یا عدم وجود جهش‌ JAK2 V617F می‌تواند بر پیش‌آگهی تأثیر بگذارد و مرتبه ی خطر را برای بیماران مبتلا به MPNs اطلاع دهد.

دامنه کاربرد

کیت RTP JAK2 Quantitative Detection  جهت   تشخیص کمی جهش V617F در ژن  JAK2 با استفاده از تکنیک  Real-Time PCR بر روی DNA ژنومی بیماران مشکوک به اختلال میلوپرولیفراتیو طراحی گردیده است.

مبنای واکنش

اساس کیت مبتنی بر تکثیر ناحیه ژن آللی جهش V617F در ژن JAK2  توسط پرایمر-پروب های اختصاصی نسبت به DNA ژنومی نوع وحشی است. کیت RTP JAK2 Quantitative Detection  از پروب فلورسنت اختصاصی جهت شناسایی و سنجش کمی  موتاسیون  JAK2 V617F/G1849T DNA با قابلیت سنجش ژن جهش یافته JAK2 V617F با کپی پایین (1٪) در نمونه استفاده می کند.

*پروب DNA مورد استفاده برای تشخیص تکثیر موتانت Jak2 فلوفور FAM می باشد.

*برای تشخیص محصول واکنش PCR ژن Wild type  از رنگ فلورسنت Hex استفاده شده است.

ویژگی های کاربردی

• دارای حساسیت  تا 1٪ کپی توالی جهش یافته در پس زمینه 99٪ DNA  آلل نوع وحشی.
• استانداردهای کمی تعبیه شده در کیت برای جهش ژنومی JAK2 V617F با پنل مرجع بین المللی WHO کالیبره شده است.
• کیت تشخیصیRTP Jak2 Quantitative دارای سرعت بالا، کارآیی آسان برای کاربر می باشد و با انواع دستگاه های Real -Time PCR   موجود در بازار سازگار می باشد.

شرایط نگهداری کیت

دمای نگهداری	دمای  -15 تا -20 درجه ی سانتی گراد
حساسیت به نور و دما	محلول پرایمر و پروب ها به نور حساس هستند.
تعداد دفعات ذوب	اجزای کیت  قابلیت سه مرتبه متوالی ذوب و انجماد را دارند. از ذوب و انجماد محلول ها بیش از سه مرتبه جدا خودداری کنید.
تاریخ انقضا	از زمان تولید به مدت 12 ماه

کمترین حد شناسایی (LOD)

کمترین حد شناسایی به معنای کوچکترین مقدار نشانگر هدف می باشد که می تواند دقیقاً شناسایی شود. LOD کیت RTP Jak2 Quantitative به عنوان کمترین مقدار DNA جهش یافته در پس‌زمینه DNA نوع وحشی تعریف می‌شود که در آن یک نمونه جهش یافته نتایج مثبت جهش را در 95٪ آزمایش‌ها ارائه می‌دهد. کمترین حد شناسایی موتاسیون برای این کیت برابر با 1٪ کپی توالی جهش یافته در پس زمینه 99٪ DNA  آلل نوع وحشی می باشد.

مشخصات

ویژگی های کیت RTP Jak2 Quantitative به صورت اختصاری در جدول زیر ارائه شده است:

توضیحات
روش مورد استفاده	Real-Time PCR
نوع نمونه	خون کامل، خون محیطی تصفیه شده، لنفوسیت ها، سلول های چند هسته ای یا گرانولوسیت ها
مدت زمان انجام واکنش	90 دقیقه
تعداد تست	24 تست

---

[1] Myeloproliferative neoplasm

[2] Secondary polycythemia

[3] Thrombocytosis